簡(jiǎn)述保護(hù)柱的四大填裝方法

更新時(shí)間：2022-12-05

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　　高純硅膠在色譜技術(shù)中應(yīng)用廣泛，其在效率、硬度及性能方面均優(yōu)于其他填料。商品化的硅膠填料在純度上有所不同，取決于制備技術(shù)。因此，不同廠家的保護(hù)柱在保留性能、柱效及峰形上有很大差異，但具有相似的選擇性。

　　下面要為大家介紹的是保護(hù)柱的四大填裝方法：

　　1、壓勻漿法裝填

　　將填料懸浮在適宜的勻漿液中制成勻漿，在其尚未沉降之前，很快以高壓泵將其以很高的流速壓進(jìn)柱中，便可制備出填充均勻的柱子。這是常見(jiàn)的分析和制備色譜柱的裝填方法。

　　2、密度法裝填

　　在HPLC發(fā)展的早期，常采用“等密度法”來(lái)填裝柱。多孔硅膠的骨架密度較高。不同牌號(hào)的硅膠因制法不同而有差異，但多在2.2g/cm3以上。因此，需以高密度溶劑配制密度與硅膠骨架密度相近的混合液。常使用的高密度溶劑為碘代和溴代烷類(lèi)，再與適當(dāng)比例的其他溶劑相配，配制出具有密度適宜的液體，使填料能呈“失重”狀態(tài)懸浮于勻漿液中，以從容地用高壓泵將其壓入空色譜柱中，制出填裝均勻的色譜柱。

　　3、法裝填

　　對(duì)于粒徑較大的填料，可以用干法裝填，其基本方法與填裝氣相色譜柱類(lèi)似。但需注意的一點(diǎn)是，在干法填裝制備液相色譜柱時(shí)，不要過(guò)分劇烈地振動(dòng)和敲打。振動(dòng)和敲打會(huì)使填料因自身粒徑的不均勻性而產(chǎn)生柱子整體上的不均一性，即較大的填料粒子靠近柱壁，而較細(xì)粒徑者則傾向集中于柱中心。這種柱內(nèi)顆粒分布的不均勻性，會(huì)導(dǎo)致柱效的降低。比較好的方法是采用小量多次的方法向柱內(nèi)加入填料，例如每次加入相當(dāng)于3-5mm柱床的填料，裝一點(diǎn)即在實(shí)驗(yàn)臺(tái)或桌面上垂直地輕輕磕幾十下，續(xù)加一些填料后，重復(fù)上述操作，直至填裝完成。

　　4、粘度法裝填

　　高粘度法，即使用黏度較高的勻漿液體系以阻止顆粒的沉降。可以采用乙二醇、聚乙二醇、甘油以及石蠟油等高黏度液體調(diào)配勻漿液。但是，高黏度導(dǎo)致流體阻力加大，必將延長(zhǎng)裝柱時(shí)間且需使用更高的裝柱壓力，在實(shí)用上很不方便。因此，高黏度法已很少被采用。